Universalclimate.com

Överföringsmetoder elektronmikroskopi

Överföringsmetoder elektronmikroskopi

Överföring elektronmikroskop, eller TEM, är en favorit verktyg biologer för sin förmåga att producera ultra hög upplösning bildspråk som konventionella Mikroskop kan inte. Eftersom TEM kräver elektroner och fotoner inte att skapa dess bilder, använder den elektromagneter istället för linser att fokusera. Enheten kräver höga spänningar och högvakuum att fungera, som kräver speciella metoder för provberedning.

Hela monteringen tekniker

TEM imaging kräver låg vatten i provet eftersom vatten kan orsaka imaging elektronerna fångas eller utspridda. Dock med särskilt små eller tunna prover, kan hela provet vara monterade för visning, som det görs synliga. Positiv färgning ger fläckar provet att göra den synlig, medan negativa färgning förlägger unstained provet i ett mörklagt medium. Shadow färgning används för att kasta en vinkel av ämnet för pseudo 3D imaging.

Ultra-tunn snittningsfönster tekniker

Dessa tekniker rymma den TEM behovet av tunn prover genom att göra tunna skivor i stickprovet för lättare imaging. Detta kan ske på flera sätt, främst genom att bädda in provet i kåda innan skära den, men kryosnitt tekniker växer i popularitet. Detta används i princip en kemikalie för att skydda provet från skador medan det fryser, och då skivning provet efteråt för studien. Enzymer och kolloidalt guld kan användas för att lyfta fram specifika proteiner.

Snabb infrysning metoder

Om ett prov har frusit tillräckligt snabbt, kan vattnet i det stelnat utan att orsaka skador till strukturer i provet eftersom iskristaller aldrig får tillfälle att form. Det finns ett antal sätt detta kan ske. Provet kan snabbt nedsänkt i en super kall vätska, smällde mellan två super kalla källor, besprutas med en frysning agent eller ens trotsat av en fryst nål. Den senare metoden skär och fryser provet samtidigt.

Frysa etsning och replikeringstekniker

När provet själv inte kan studeras genom TEM direkt--kan oftast på grund av vatten innehåll eller kemiska smink--en visuell kopia av provet ibland skapas. Denna mekanism innebär frysning provet utan hänsyn till bildandet av kristaller, spräckning provet och sedan etsning av frystorkning det i ett vakuum. Ytan av frysa torkade provet kopieras sedan för studien. Denna teknik är särskilt effektiv på att producera högkvalitativa bilder av inre strukturer.